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代谢组取样

    组织样本

    动物组织

    1. 首先准备好用于包装样本的铝箔或冷冻保存管,并且用油性记号笔在铝箔或冻存管外表

    多处写明样本编号;

    2. 准确切除所需组织后,立即剔除结缔组织和脂肪组织等非研究所需的组织类型。务必将

    组织分割成小块;

    3. 在生理盐水或PBS 中迅速漂洗样本,以去除血渍和污物;

    4. 用镊子夹住样本,放入液氮中冷却样本;

    5. 用准备好的铝箔或冷冻保存管装载包裹组织,迅速投入液氮或转入-80℃冰箱保存样本;

    6. 填写样本登记单,写明样本名称、组织类型、编号、取样日期、样本处理过程等情况。

    动物组织的量为 200mg/sample,保留备份,干冰低温寄送,避免反复冻融。


    临床标本

    1. 首先准备好用于包装样本的铝箔或冷冻保存管,并且用油性记号笔在铝箔或冻存管外表

    多处写明样本编号;

    2. 准确切除所需组织后,并将组织切割成小块,用镊子夹住样本,立即投入液氮冷冻;

    3. 用准备好的铝箔或冷冻保存管装载包裹组织,迅速投入液氮或转入-80℃冰箱保存样本;

    4. 填写样本登记单,写明样本名称、组织类型、编号、取样日期、样本处理过

    程等情况。

    临床组织的量为 200mg/sample,保留备份,干冰低温寄送,避免反复冻融。


    植物组织

    1. 准确取得所需组织后,用锡箔纸包裹,或放入进口冻存管中,拧紧管盖。锡箔纸或冻存

    管要事先做好标记;

    2. 立即投入液氮冷冻,然后于液氮中存放或转入-80℃超低温冰箱保存;

    3. 填写样本登记单,写明样本名称、组织类型、编号、取样日期、样本处理过程等情况。

    基因芯片,蛋白质组学植物组织的量为2g/sample,代谢组学植物组织的量为200mg/sample,

    保留备份,干冰低温寄送,避免反复冻融。



    血清、尿液样本

    1. 血清

    样品量要求

    NMR 实验500ul/sample;GC-MS,LC-MS 实验200ul/sample;一定避免反复冻融。

       

    样本收集步骤

    血液收集在离心管中静置 30 分钟进行凝固分层。然后低速离心取上清装载干净的离心管中,

    再高速离心5 分钟,取上清分装到冻存管中,每管0.5ml,-80 度冻存寄送。


    注意事项

    1)取血时如用酒精消毒,请擦干擦拭部位,待酒精完全挥发后再取样。

    2)取血时如用麻醉剂,建议用异氟醚,防止在 NMR 血清谱图中出现干扰峰。

    3)如要采用血浆,请务必使用肝素钠抗凝管。


    2. 尿液

    样本量要求

    1ml/例,原则上可以多取一点。


    样本收集步骤

    晨起中段尿(临床)或晨间 1 小时尿(动物)直接分装到离心管中,每管1ml,

    添加一滴(约 10ul)质量体积为1/100(w/v)的叠氮化钠,-80 度冻存寄送。

     

    注意事项

    1)动物1 小时尿量不够,可分多次收集,如果需要收取24h 尿液,请使用带有低

    温装置的代谢笼收取,并添加叠氮化钠。

    2)叠氮化钠的作用是防腐杀菌,有毒,请万分小心。



    微生物样本

    1. 酵母菌,真菌,细菌

    菌体数量

    1*108(一般OD600≈0.6 时,细菌处于生长指数其,浓度为108cells/ml。)为一

    次实验的用量,**给2 次实验的用量。


    详细取样步骤

    1)淬灭:培养好的菌液混匀后,取出1ml 菌液到10ml 离心管中,然后迅速加入预冷的淬

    灭试剂60%甘油盐溶液(-23℃)4ml(-23℃预冷,甘油-盐溶液,3:2(v/v),如:向1.35%

    的 NaCl 溶液200ml 中加入甘油300ml)。迅速涡旋混匀(vortex,2s),然后放入-20℃冰箱

    冷冻(约5min);

    2)离心:将淬灭好的菌液进行离心,12000g,20min,-20℃;

    3)漂洗:离心处理完毕后,去除上清,加入2ml 漂洗液(-20℃预冷,甘油-盐溶液,1:1(v/v)

    如:向1.35%的 NaCl 溶液(200ml)中加入甘油(200ml)),涡旋混匀,离心,去除上清,

    条件同上;

    4)将沉淀(菌体)进行冻干处理;

    5)冻存到-80℃冰箱内,干冰寄送到我公司。


    2. 革兰氏阴性及革兰氏阳性菌(如枯草芽孢杆菌,大肠杆菌等)

    菌体数量

    1*108 为一次实验的用量,**给2 次实验的用量。


    取样步骤

    1) 淬灭:70%冷甲醇(-70℃)

    2) 快速过滤

    3) 冻干,-80℃冻存

    4) 低温寄送


    3. 酵母(Yeast)

    菌体数量

    1*108 为一次实验的用量,**给2 次实验的用量。


    取样步骤

    1) 淬灭:60%冷甲醇(-40℃)

    2) 快速过滤

    3) 冻干,-80℃冻存

    4) 低温寄送


    4. 木霉菌

    菌体数量

    1*108 为一次实验的用量,**给2 次实验的用量。


    取样步骤

    1) 淬灭:20%冷甘油(-70℃)

    2) 快速过滤

    3) 冻干,冻存

    4) 低温寄送

文章分类: 样本库