单细胞测序运用实践--细胞悬液制备经验分享单细胞检测技术的发展将生命科学研究推向了一个全新的维度。基于单细胞技术，我们对生命体的理解，对疾病组织的了解上升到了最基本的单元—细胞。通过对组织中的各类细胞的基因特征检测与分析，增进了我们对细胞的本身特性及细胞与细胞之间互作关系的理解。正是基于单细胞检测技术在各类疾病中的研究运用，使得我们对疾病的发生发展和抗药等的了解更加深入，更加明确，也更能找到最核心、影响**的某类细胞和基因。可以说，正是单细胞检测技术的发展和运用，极大地加速了科学研究往临床的转化和运用。  单细胞技术用于肿瘤研究。 引自：Cancer Cell. 2020 Apr 13;37(4):456-470. 虽然我们进行单细胞测序的研究目的不尽相同，但绝大多数研究是以组织样本作为研究材料。目前单细胞测序实验首先要将组织解离为单细胞悬液，再上机进行油包水、建库、测序、数据分析。而我们知道生命体是相当复杂的，以人体为例，人体是由四大组织系统组成的，包括上皮组织、结缔组织、肌肉组织、神经组织。不同组织的细胞构成、细胞特性、细胞间质组成可能有很大的差异。比如，上皮组织由密集的上皮细胞和少量细胞间质构成。结构特点是细胞结合紧密，细胞间质少；结缔组织由细胞和大量细胞间质构成，细胞间质包括基质、细丝状的纤维和不断循环更新的组织液，细胞散居于细胞间质内；肌细胞间有少量结缔组织，并有毛细血管和神经纤维等；神经组织是神经系统的主要组成成分，由神经细胞和神经胶质组成，神经细胞会有很长的突起。  人体组织分类图 这些组织差异使得单细胞悬液制备没有统一的protocol，而单细胞测序对单细胞悬液质量要求也比较高。因此需要根据组织类型，甚至是相同组织的不同疾病状态等摸索特定的实验条件，比如组织剪碎方式、酶种类和浓度选择、酶解时间选择、酶解条件选择等等。 经过多年的摸索与实践，我们已对包括人、大鼠、小鼠等在内的各类组织成功进行单细胞制备实验，为单细胞后续实验的成功开展打下了坚实的基础。包括人，大、小鼠及其他模式生物。 --部分单细胞悬液制备结果--  人-胆管癌  人-胃癌  人-肝癌  人-肠息肉 --部分人，大、小鼠制备消化经验一览--
文章分类：
单细胞测序
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