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Quick KO快敲小鼠简介
Quick KO快敲小鼠技术优势
Quick-KO快敲小鼠流程

简介

基因的功能性缺失,是找与表型相关特定基因靶点的重要方法。CRISPR/Cas9可以通特定的sgRNA高特异性地靶向目的DNA序列,造成指定位点的DNA断裂,从而引入Indel(Shortinsert/deletion)突致目的基因的功能完全缺失。近年来对CRISPR/Cas9化和改,使得基因敲除的效率和特异性进一步提高,在某些域已逐步取代传统的RNAi术。

公司在最新的CRISPR/Cas9础上了一套Quick-KO,能高效、快速并且低成本地实现细胞的基因敲除,针对几十到几百个目的潜在靶点基因筛选,能在2~3个月内完成批量的基因敲除胞株的构建,全基因库筛选,可有效小范,提高研究效率。

方法

提供潜在靶点基因清,派致根据目的基因设计sgRNA,通过Quick-KO平台行基因敲除胞系构建,在敲除株的基行功能筛选,通抗性分析或者marker基因告系统进筛选结果的分析。

  步

1. 明确筛选细胞和靶点清

2. 设计sgRNA

3. 对目的细胞进行检测(支原体检测,单克隆形成率检测,转染效率检测)

4. Quick-KO统进克隆敲除株构建

5. 药物筛选

6. 细胞活性分析

7. 撰写基因筛选报

  后实验

1. 针对筛选的基因敲除胞株行裸鼠成瘤(CDX)模型建立

2. CDX小鼠目的物的治

3. 检测肿瘤生长状况,在体评估筛选到的目的基因。

1、速度快:最快8周获得F0代阳性鼠。

2、效率高:F0代100%功能性完全敲除。

3、数量多:可提供至少8只功能性完全敲除小鼠供基因初筛。

项目流程.jpg

1、sgRNA设计和筛选。

2、小鼠受精卵显微注射和胚胎移植。

3、F0代小鼠繁殖。

4、小鼠鉴定。