脂质组学

　lipidomics

脂质是自然界中存在的一大类极易溶解于有机溶剂、在化学成分及结构上非均一的化合物，主要包括脂肪酸及其天然发生的衍生物，以及与其生物合成和功能相关的化合物。脂质组学是代谢组学的一个分支，一般认为脂质组学是研究生物体内所有脂质分子的特性，以及它们在蛋白表达和基因调控过程中作用的学科。目前已建立的脂质组学分析方法较多，较先进的软电离质谱（ESI-MS）能对脂质分子进行定性和定量分析，已成为脂质组学强有力的工具。

产品介绍

The service content

脂质组学

脂质组学的研究于人类的健康密切相关。目前脂质组学已经成为代谢组学的重要分支之一，而且研究热度越来越高，尤其在疾病研究领域尤为突出，如代谢紊乱，心血管代谢综合征、肿瘤、Alzheimer's disease等。此外脂质还参与生长发育、神经信号转导、光合作用等多种生理过程。

脂质分类：

LIPID MAPS®系统命名包括了八大类脂质：脂肪酸类（如亚油酸、花生酸等）、甘油脂类（如TG、DG等）、甘油磷脂类（如PC、PE、PG、PA等） 、鞘脂类（如Cer、SM等）、固醇脂类（如固醇酯等）、糖脂类（如MGDG、SQDG等）、孕烯醇酮脂类（如CoA等）和多聚乙烯类（抗生素等）

从脂质的研究方法来看，目前已经建立的脂质分析方法较多。主要有薄层色谱（thin-layer chromatography，TLC）法、气相色谱质谱联用（gas chromatography-mass spectrometer，GC-MS）法、电喷雾电离质谱（electrospray ionizationmass spectrometry，ESI-MS）法、基质辅助激光解吸附电离飞行时间质谱(matrix assisted laser desorp-Uon /ionization-time of flight mass spectrometry，MALDITOF-MS)法和核磁共振(nucIearmagnetic resonance，NMR)法等。较先进的ESI-MS法能对脂质的分子种进行定性和定量分析，已经成为脂质分析的强有力工具。

实验流程

脂质提取方法：

1.将细胞用600 μL甲醇-水=1:1（V/V）转移至10 mL 玻璃小瓶中，加20 μL内标（Lyso PC 17:0, 浓度为0.1 mg/mL 甲醇配置），加入600 μL氯仿，超声破碎；

2.细胞超声破碎后的溶液在冰水浴中提取10 min；

3.将所有液体转移到LC-MS 进样小瓶中，4°C静置30 min；

4.液体分层，取下层液体(氯仿层) 600 μL，（若未能明显分层，则需要离心使其分层）转移到另一高回收率GC-MS进样小瓶中；真空挥干；

5.在取完下层溶液的离心管中继续加入600 μL氯仿-甲醇=2:1（V/V），漩涡震荡30 s；冰水浴中超声提取10 min；

6.4°C静置30 min后，取下层液体，继续放入原来的GC-MS小瓶中挥干；

7.挥干后，GC-MS小瓶中的脂质残渣用300 μL异丙醇-甲醇=1:1（V/V）复溶（涡旋30 s，超声3 min），将溶液转移至1.5 mL的离心管中，12000 rpm，4度，离心15 min 后，取200 μL 上清液装入带内衬管的LC-MS进样小瓶中，用于LC-MS分析；

仪器设备

Waters ACQUITY UPLC I-Class 超高效液相色谱系统

Waters Vion IMS QTOF

脂质组学生信分析软件：

代谢物定性检索软件：Progenesis QI v2.3 软件(Nonlinear Dynamics, Newcastle, UK)多元统计分析：SIMCA-P 14.1（Umetrics, Umea, Sweden）

作图软件：R语言

脂质组学检测结果展示（部分）：

•                                                    PCA分析图

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•                                                   热图

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•                                                               相关性图

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  　　　　　　　　　　　　　　代谢通路图

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  　　　　　　　　　　　　　　　　　火山图